Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. er en af de mest erfarne producenter og leverandører af 3xflag peptid cas 402750-12-3 i Kina. Velkommen til engros bulk højkvalitets 3xflag peptid cas 402750-12-3 til salg her fra vores fabrik. God service og rimelige priser er til rådighed.
3XFLAG Peptider en vigtig peptidmarkørsekvens, der i vid udstrækning anvendes i proteinekspression og rensningsprocesser i biomedicinsk forskning. Molekylformel C120H169N31O49S, CAS 402750-12-3. Sammensat af 23 aminosyrer, dens sekvens indeholder tre gentagne Asp Tyr Lys Xaa Xaa Asp motiver, som giver den specifikke strukturelle træk.
Har god opløselighed i specifikke opløsningsmidler. For eksempel i DMSO er dets opløselighed høj, hvilket gør det praktisk til operationer og eksperimenter i opløsning. Derudover kan den også opnå god opløsningseffekt i vand ved mild opvarmning. Det har også nogle særlige egenskaber. For eksempel har det god antigenicitet og reaktivitet og kan binde til specifikke anti-FLAG-antistoffer. Denne bindingsevne gør den bredt anvendelig i eksperimenter såsom immunpræcipitation. Ved kompetitiv binding til Anti-FLAG-antistoffer kan det FLAG-fusionsudtrykte protein, der binder til Anti-FLAG-antistoffer, elueres under immunpræcipitation, hvorved der opnås lokalisering, påvisning og oprensning af målproteinet.
|
Tilpassede flaskehætter og propper:
|
|


|
Kemisk formel |
C120H169N31O49S |
|
Præcis masse |
2860 |
|
Molekylvægt |
2862 |
|
m/z |
2861 (100.0%), 2860 (77.0%), 2862 (32.9%), 2862 (31.4%), 2863 (22.1%), 2862 (11.5%), 2863 (10.1%), 2861 (8.8%), 2864 (8.1%), 2862 (7.8%), 2863 (7.4%), 2863 (5.3%), 2863 (4.5%), 2862 (3.5%), 2864 (3.3%), 2864 (3.2%), 2865 (2.2%), 2865 (2.1%), 2864 (2.1%), 2862 (1.9%), 2862 (1.9%), 2861 (1.5%), 2864 (1.5%), 2861 (1.4%), 2864 (1.4%), 2863 (1.2%), 2864 (1.2%) |
|
Elementær analyse |
C, 50.36; H, 5.95; N, 15.17; O, 27.39; S, 1.12 |

3XFLAG Peptider et tag brugt i proteinforskning, bestående af 8 aminosyrer med sekvensen DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. Dens hovedfunktion er at tjene som en markør for proteinekspression og oprensning, hvilket giver et praktisk og effektivt middel til forskning.

1. Affinitetsrensning:
Det kan bruges som et mærke til proteinoprensning, og gennem dets høje affinitet med anti-FLAG-antistoffer kan målproteinet let oprenses. Sædvanligvis co-transficeres målproteinet ind i celler med en ekspressionsvektor indeholdende 3X FLAG-PEPTIDE og oprenses derefter ved affinitet ved anvendelse af anti-FLAG-antistoffer for hurtigt og effektivt at opnå et målprotein med høj renhed.
2. Immunologisk testning:
På grund af dets høje immunogenicitet kan det bruges til at detektere proteinekspression og lokalisering. Ved at bruge specifikke anti-FLAG-antistoffer kan eksperimentelle teknikker såsom immunoblotting og immunfluorescensfarvning udføres for hurtigt og præcist at detektere ekspressionsniveauet og fordelingen af målproteiner.

3. Klonfiltrering:
Det kan også bruges til bekvemmelighed af proteinklonscreening. I konstruktionsprocessen af proteinekspressionsvektorer kan det at forbinde gensekvensen af målproteinet med 3XFLAG-sekvensen lette screeningen af positive kloner med målproteinet gennem immundetektion og andre metoder, og derved accelerere processen med proteinfunktionsforskning.
4. Immunpræcipitation:
Det kan også bruges til proteinimmunfældningseksperimenter. Ved at binde proteiner indeholdende 3X FLAG PEPTIDE tags til anti FLAG antistoffer og derefter bruge adsorptionsmaterialer såsom protein A/G agarose eller magnetiske perler, kan målproteinet og dets interagerende partnere selektivt udfældes fra celleekstrakter for at studere proteininteraktionsnetværket.


5. Narkotikascreening:
Det kan også bruges i lægemiddelscreeningsforskning. Ved at kombinere 3X FLAG PEPTIDE-tagget med proteinet af interesse, kan høj-gennemstrømningsscreening af proteinet opnås. Denne screeningsmetode kan bruges til at opdage nye lægemiddelmål, evaluere lægemiddelproteininteraktioner og så videre.
6. Proteinfunktionsforskning:
Introduktionen af mærker påvirker ikke den naturlige struktur og funktion af proteiner signifikant, og kan derfor bruges til at studere de biologiske funktioner, subcellulær lokalisering, interaktioner og signaltransduktion af proteiner. Ved at introducere 3X FLAG PEPTIDE-tagget kan der udføres-dybdegående forskning i proteiners biologiske egenskaber, hvilket hjælper med at afsløre deres virkningsmekanismer i cellulær biologi og fysiologi.


3XFLAG Peptider et peptid indeholdende 8 aminosyrer med sekvensen DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. Det bruges almindeligvis som et proteinmærke til bekvem oprensning, påvisning og forskning af målproteiner. I processen med biosyntese kan det fremstilles gennem kemisk syntese eller genteknologiske metoder. Følgende er de detaljerede trin af genteknologiske metoder:
1. Design og syntetiser gener:
For det første er det nødvendigt at designe et kunstigt gen indeholdende 3X FLAG PEPTIDE-sekvensen. Dette gen bør indeholde 3X FLAG PEPTIDE-sekvensen samt passende promotorer, terminatorer og selektionsmarkører (såsom antibiotikatolerancegener). Udformningen af gener bør tage hensyn til målværtens egenskaber og ekspressionsbehov.
2. Genkloning:
Dernæst vil de designede kunstige gener blive klonet ind i passende ekspressionsvektorer. Almindeligt anvendte vektorer omfatter plasmider, virale vektorer osv. Kloningsprocessen omfatter typisk følgende trin:
-PCR-amplifikation: Brug af polymerasekædereaktion (PCR) til at amplificere målgensekvensen fra template-DNA.
-Fordøjelse og forbindelse: PCR-produkter fordøjes med ekspressionsvektorer ved hjælp af restriktionsendonukleaser og forbindes derefter med DNA-ligaser.
-Transformation: Transformation af den forbundne ekspressionsvektor til bakterieværter såsom Escherichia coli for at danne et rekombinant plasmid.
-Identifikation: Rekombinante plasmider blev identificeret gennem PCR, enzymfordøjelse, DNA-sekventering og andre metoder for at bekræfte, at målgenet er blevet klonet ind i vektoren.
3. Ekspressionsmålprotein:
Transficer den konstruerede ekspressionsvektor ind i målværtsceller, såsom pattedyrceller, gærceller, insektceller osv. I celler transkriberes ekspressionsvektoren til mRNA og translateres derefter til proteiner . 3X FLAG PEPTIDE vil blive udtrykt sammen med målproteinet som et proteinmærke.
4. Proteinekstraktion:
Saml transficerede celler og udfør cellefragmentering, centrifugering og andre behandlinger for at opnå det samlede proteinekstrakt.
5. Oprenset protein:
Ved anvendelse af affinitetsoprensningsteknikker, såsom immunpræcipitation og affinitetschromatografi, blev målproteiner indeholdende 3X FLAG PEPTIDE-mærker oprenset fra det samlede ekstrakt. Dette involverer normalt binding af anti-FLAG-antistoffer til proteiner, der indeholder 3X FLAG-PEPTIDE, og derefter adskille dem ved hjælp af affinitetskromatografisøjler eller magnetiske perler.
6. Identificer proteiner:
Det oprensede protein blev identificeret og kvantificeret ved SDS-PAGE gelelektroforese, immunblotting, massespektrometri og andre teknologier for at sikre dets renhed og integritet.
Bivirkninger
I biomedicinsk forskning og proteinrelaterede eksperimenter spiller tag-peptider en afgørende rolle. De kan hjælpe forskere med at rense, detektere og lokalisere målproteiner, hvilket i høj grad fremmer udviklingen af proteinvidenskab.3XFLAG Peptider et almindeligt og meget brugt tag-peptid sammensat af tre gentagne FLAG-tag-sekvenser. FLAG-mærket blev oprindeligt designet af Hopp et al. i 1988 og senere udviklet til varianter som 3XFLAG, som har høj affinitet og specificitet og kan binde til specifikke antistoffer, hvilket letter efterfølgende isolering og identifikation. Selvom 3XFLAG har bragt mange bekvemmeligheder i eksperimenter, ligesom andre biologiske midler, kan det også forårsage nogle bivirkninger.
Immunrelaterede bivirkninger
Immunogenicitet
Immunogenicitet refererer til et stofs evne til at stimulere kroppens immunsystem til at producere et immunrespons. 3XFLAG, som et eksogent peptidsegment, kan genkendes af kroppens immunsystem som en "ikke-selv"-komponent og derved udløse et immunrespons. Selvom 3XFLAG-sekvensen er relativt kort, kan den i nogle tilfælde stadig aktivere B-celler og T-celler, hvilket fører til produktion af antistoffer. Disse antistoffer binder ikke kun til det frie 3XFLAG, men kan også genkende og binde til fusionsproteiner, der udtrykker 3XFLAG-mærket, hvilket påvirker den normale funktion og distribution af fusionsproteinet.
Allergiske reaktioner
Allergisk reaktion er en unormal immunreaktion forårsaget af, at immunsystemet er for følsomt over for visse allergener. Individuelle personer kan opleve allergiske reaktioner, når de bruger 3XFLAG til forsøg eller behandling. Sværhedsgraden af symptomer på allergiske reaktioner varierer. Milde tilfælde kan vise sig med lokale symptomer såsom kløe, udslæt og erytem, mens alvorlige tilfælde kan udløse systemiske allergiske reaktioner såsom anafylaktisk shock, karakteriseret ved et kraftigt blodtryksfald, vejrtrækningsbesvær og bevidsthedstab, hvilket udgør en alvorlig trussel mod livssikkerheden.
Allergiske reaktioner
Mekanismen for allergiske reaktioner er hovedsageligt relateret til IgE-antistoffer i immunsystemet. Når kroppen først kommer i kontakt med 3XFLAG, genkender immunsystemet det som et allergen og stimulerer B-celler til at producere specifikke IgE-antistoffer. Disse IgE-antistoffer binder sig til overfladen af mastceller og eosinofiler. Når kroppen kommer i kontakt med 3XFLAG igen, binder den sig til IgE-antistoffer på celleoverfladen, hvilket udløser mastceller og eosinofiler til at frigive bioaktive mediatorer såsom histamin og leukotriener, hvilket fører til forekomsten af allergiske symptomer.
Risiko for autoimmune sygdomme
Langvarig eller gentagen eksponering for 3XFLAG kan øge risikoen for at udvikle autoimmune sygdomme. Autoimmune sygdomme refererer til en type sygdom, hvor kroppens immunsystem fejlagtigt angriber sine egne væv og organer, hvilket resulterer i vævsskade og funktionsnedsættelse. 3XFLAG kan inducere immunsystemet til at producere krydsreaktive antistoffer og T-celler gennem en molekylær simuleringsmekanisme, hvor dets aminosyresekvens svarer til sekvensen af visse proteiner i sig selv.

Disse immunceller og antistoffer angriber ikke kun det fremmede 3XFLAG, men beskadiger også utilsigtet kroppens normale væv, hvilket fører til autoimmune sygdomme. For eksempel kan visse autoimmune sygdomme såsom systemisk lupus erythematosus og rheumatoid arthritis være relateret til autoimmune reaktioner induceret af eksogene stoffer. Selvom der i øjeblikket ikke er noget klart bevis for, at 3XFLAG direkte forårsager autoimmune sygdomme, kan denne potentielle risiko ikke ignoreres.
Indvirkning på cellulær funktion
I nogle eksperimentelle undersøgelser har det vist sig, at høje koncentrationer af 3XFLAG kan have toksiske effekter på celler. Manifestationerne af cytotoksicitet omfatter ændringer i cellemorfologi, forstyrrelse af cellemembranintegritet, ændringer i intracellulær enzymaktivitet og inhibering af celleproliferation. Dets virkningsmekanisme kan være relateret til interaktionen mellem 3XFLAG og cellemembranen. På grund af den stærke negative ladning af 3XFLAG,

det kan binde sig til positivt ladede komponenter på cellemembranen gennem elektrostatiske interaktioner, ændre permeabiliteten og fluiditeten af cellemembranen, hvilket fører til lækage af intracellulære stoffer eller indtrængen af skadelige stoffer udefra, og derved påvirke cellens normale fysiologiske funktioner. Derudover kan 3XFLAG også trænge ind i det indre af celler, interferere med signalveje, proteinsyntese og andre processer, hvilket yderligere forværrer celleskade.
Effekter på cellulære signalveje
3XFLAG kan interferere med intracellulære signalveje og påvirke cellers normale fysiologiske aktiviteter. Den cellulære signalvej er en samlebetegnelse for en række molekylære hændelser, hvor celler reagerer på eksterne stimuli og regulerer vigtige processer såsom cellevækst, differentiering og apoptose.


For eksempel kan det binde til receptorer på celleoverfladen, kompetitivt inhibere bindingen af naturlige ligander til receptorer og blokere signaltransmission; Alternativt kan det komme ind i cellen og binde sig til signaltransduktionsproteiner, hvilket påvirker proteinphosphorylering, dephosphorylering og andre modifikationsprocesser, hvilket interfererer med signaltransmission og amplifikation. Denne interferens med cellulære signalveje kan føre til cellulær dysfunktion, der påvirker processer såsom celleproliferation, differentiering og apoptose, hvilket igen kan have negative virkninger på den normale udvikling og funktion af væv og organer.
Virkninger på cellulært stofskifte
Cellulær metabolisme er den generelle betegnelse for en række kemiske reaktioner, der forekommer i celler, som giver energi og materialegrundlag for cellulære livsaktiviteter. 3XFLAG kan påvirke cellulære metaboliske processer, interferere med cellulær energiproduktion og stofsyntese. For eksempel kan det påvirke mitokondriernes funktion, som er de vigtigste steder for aerob respiration og energiproduktion i celler.

fører til utilstrækkelig cellulær energiforsyning. Desuden3XFLAG Peptidkan også interferere med intracellulære processer såsom glucosemetabolisme og lipidmetabolisme, påvirke balancen mellem stofsyntese og nedbrydning i celler og have en negativ indvirkning på cellers normale fysiologiske funktioner
Ofte stillede spørgsmål
Hvad er et 3X FLAG?
+
-
3X FLAG-peptidet er et syntetisk peptid med 23 aminosyrerester. Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp-motivet gentages tre gange i peptidet. Otte aminosyrer ved C-terminalen udgør den klassiske FLAG-sekvens (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys).
Hvad er forskellen mellem flag-tag og 3xflag?
+
-
Flag-tag er en enkelt sekvens på 8 aminosyrer, der almindeligvis anvendes til immunfældning, western blot og immunfluorescensapplikationer. I modsætning hertil indeholder 3x Flag-tag 22 aminosyrer, hvilket giver det en større affinitet til anti-Flag-antistoffer og gør det særligt fordelagtigt til proteinrensningsarbejdsgange.
Hvordan opløses 3X FLAG?
+
-
For at fremstille en stamopløsning opløses i TBS (50 mM Tris-HCl, pH 7,4, med 150 mM NaCl) i en koncentration på 5 mg/ml. Alikvoter og opbevar ved –20 grader. Gentagen frysning og optøning anbefales ikke.
Populære tags: 3xflag peptid cas 402750-12-3, leverandører, producenter, fabrik, engros, køb, pris, bulk, til salg




