Pentagastrin CAS 5534-95-2

Målsekvens: Boc- -Ala-Trp-Met-Asp-Phe-NH₂. AC-til-N-terminal sekventiel kondensationsstrategi er vedtaget, hvor L-phenylalaninamid tjener som C--terminalt udgangsmateriale.

Selektiv side-kædebeskyttelse er implementeret for individuelle aminosyrer: -carboxylgruppen i asparaginsyre beskyttes via benzylesterificering, indoldelen af ​​tryptophan gennemgår mild dækning, og Boc bruges til forbigående amino-gruppeafskærmning.

Ved at bruge klassisk DCC/HOBt som kondensationsreagenser fortsætter koblingen ved lav temperatur i DMF med sekventiel inkorporering af Asp, Met og Trp, efterfulgt af endelig konjugation med Boc- -alanin.

Efter-kondensering fjerner hydrogenolyse ved lav-temperatur benzyl-baserede side-kædebeskyttelsesgrupper, og resterende spor af Boc-grupper spaltes under mild TFA-behandling.

Det koncentrerede råprodukt omkrystalliseres fra et acetonitril-vandblandet opløsningsmiddelsystem. Med lav kapitalinvestering i produktionsudstyr blev denne proces bredt anvendt til tidlig bulk-lægemiddelfremstilling med et samlet udbytte på mellem 32 % og 38 %. Dens største ulemper omfatter besværlig mellemisolering og overdreven affaldsudledning, hvilket fører til gradvis udskiftning med fastfasesynteseteknologi.

2-chlortritylchloridharpiks (CTC-harpiks) er valgt som den faste bærer. Fmoc-Phe-NH2 forankres først på harpiksmatrixen, og ubesatte reaktive harpikssteder lukkes med methanol.

Med DMF som reaktionsmedium afsluttes Fmoc-afbeskyttelse ved hjælp af piperidin, og carboxylaktivering realiseres med HBTU/HOBt. Fmoc-Asp(OBzl), Fmoc-Met og Fmoc-Trp kobles sekventielt fra C-terminalen mod N-terminalen, og terminal Boc- -Ala (Fmoc-fri) introduceres i det sidste trin.

Spaltning fra harpiks og global sidekæde-afbeskyttelse udføres ved omgivelsestemperatur med TFA-spaltningscocktail; harpiksen fjernes ved filtrering, og det koncentrerede filtrat underkastes præparativ omvendt-fase HPLC-rensning på en C18-søjle med gradienteluering af acetonitril-vand, efterfulgt af lyofilisering for at give bulkfarmaceutisk materiale med høj -renhed med samme renhed som 5% til 9% af det samlede råmateriale. mellem 52 % og 60 %.

Denne metode har minimale bivirkninger og ligetil oprensning, der overholder produktionsspecifikationerne for aktive farmaceutiske ingredienser af farmakopé-. I de seneste år har optimerede miljøvenlige procedurer, der anvender fluor-fri spaltningsreagenser, drastisk reduceret forurening af spildevand- og blevet den foretrukne produktionsteknologi for farmaceutiske producenter verden over.

I 1905 fremsatte den britiske fysiolog Edkins den hypotese, at den antrale ventrikulære slimhinde udskiller gastrin, en humoral faktor, der modulerer mavesyreproduktionen via blodcirkulationen.

Begrænset af utilstrækkelige rensningsteknologier forblev denne hypotese kontroversiel og ubevist i næsten et halvt århundrede. I 1926 validerede den kinesiske fysiolog Lin Kesheng eksistensen af ​​gastrointestinale endokrine stoffer via dyreforsøg og supplerede den fysiologiske ramme for gastrinhypotesen, men alligevel blev naturligt monomert gastrin ikke isoleret.

Det var først i 1959, at Gregory og Tracy fra University of Liverpool, UK, rensede naturligt heptadecapeptid gastrin G17 fra antral slimhinde hos svin ved hjælp af modstrømsfordeling og Sephadex gelkromatografi. Deres verifikation af dets syrestimulerende-aktivitet lagde et solidt kemisk og fysiologisk grundlag for gastrinforskning.

I 1964 afsluttede det samme forskerhold fuld aminosyresekventering af G17. Segmentel syntese og screening bekræftede, at det C-terminale tetrapeptid Trp-Met-Asp-Phe-NH₂ udgør den farmakofore kerne, der fuldt ud bevarer den native gastrins receptor-bindingskapacitet og mavesyrestimulerende{{8}, hvor den lange aminosyre{8} kæden regulerer kun{10}}in vivo metabolisme uden nogen væsentlig farmakologisk funktion.

På baggrund af presserende klinisk efterspørgsel efter standardiserede diagnostiske reagenser til mavesyrefunktion og de høje omkostninger plus begrænset forsyning af ekstraheret naturligt heptadecapeptid, samarbejdede ICI Pharmaceuticals med fysiologiske forskere om at lancere et udviklingsprojekt.

Ved at konjugere Boc-beskyttet -alanin til aminoterminalen af ​​det aktive tetrapeptid blev et mere stabilt pentapeptidderivat konstrueret til at modstå hurtig enzymatisk hydrolyse in vivo.

Fuld kemisk syntese afpentagastrinblev udført af Kontureks forskningsgruppe i 1967 med in-in vitro- og dyreassays, der bekræftede dets syre--sekretagogiske styrke svarende til naturligt gastrin. Agenten opnåede markedsføringsgodkendelse i Europa samme år og er siden blevet guld-standardreagenset til testning af mavesyreproduktion.

Efterfølgende godkendelser blev givet i USA, Japan og Kina til gastrinomscreening og vurdering af parietalcellefunktion. Fra 1990'erne udvidede dets anvendelse til grundlæggende forskning som en farmakologisk værktøjsforbindelse rettet mod CCK-B-receptoren, og den er til dato en klassisk referenceforbindelse inden for fordøjelsesfarmakologi.