Liraglutide pulver CAS 204656-20-2

Liraglutidpulver, Molekylær formel C172H265N43O51, CAS 204656-20-2, molekylvægt 1209.40. Det er en kunstigt syntetiseret acyleret human glukagon som peptid-1 (GLP-1) analog med over 97% sekvenslighed sammenlignet med naturlig GLP-1. Kan opløses i vand, ethanol og propylenglycol. Den 34. lysinposition af det naturlige GLP-1-molekyle erstattes af arginin, som ikke kun bevarer og forlænger bindingstiden mellem acyleringsprodukter og proteiner, men også væsentligt overvinder ulempen ved let nedbrydning af GLP. Under normale opbevaringsbetingelser udviser det god stabilitet, og dens vandige opløsning kan opretholde fysisk og kemisk stabilitet i mindst 2 år.

Genetisk toksicitet: Resultaterne af Ames -testen forLiraglutidpulver, den kromosomale aberrationstest for humane perifere blodlymfocytter, og rotte -mikronukleus -testen var alle negative.

Reproduktiv toksicitet:

1. Hanrotter blev subkutant injiceret med 0,1, 0,25 og 1,0 mg/kg/d liraglutid 4 uger før parring og under parring. Ved en dosis på 1,0 mg/kg/d blev mandlig dyrs fertilitet ikke direkte påvirket. I henhold til plasma -AUC -beregninger var den systemiske eksponering, der blev genereret af denne dosis, cirka 11 gange den for menneskelig eksponering ved den maksimale anbefalede humane dosis (MRHD). Subkutan injektion af 1,0 mg/kg i kvindelige rotter resulterede i øget tidlig embryonal død, synlig vægtøgning og nedsat fødeindtag.

2. fra 2 uger før parring til den 17. graviditetsdag hos kvindelige rotter blev subkutane injektioner på 0,1, 0,25 og 1,0 mg/kg/d liraglutid administreret. I henhold til plasma -AUC -beregninger var den systemiske eksponering, der blev genereret af disse tre doser, henholdsvis ca. 0,8, 3 og 11 gange den for menneskelig eksponering under MRHD. I dosisgruppen på 1 mg/kg/d var der en svag stigning i antallet af tidlige embryonale dødsfald. Ved alle doser blev føtal abnormiteter, nyre- og vaskulære variationer, uregelmæssig ossifikation af kraniet og en komplet tilstand af overdreven ossifikation observeret. Ved en dosis på 1,0 mg/kg/d blev der observeret plettet lever og let ribbenvridning. Forekomsten af ​​føtal misdannelser, der overstiger den samme periode, og historisk kontrol er: oropharyngeal misdannelser og/eller stenose ved halsenåbningen i en dosis på 01 mg/kg/d, og navlestrygningsdefekter ved doser på 0,1 og 0,25 mg/kg/d.

Den 6. til 18. graviditet blev kaninerne subkutant injiceret med liraglutid i koncentrationer på 0,01, 0,025 og 0,05 mg/kg/d. I henhold til plasma -AUC -beregninger var den systemiske eksponering af gravide kaniner lavere end for mennesker under MRHD. Ved alle doser faldt føtalvægten, og den samlede forekomst af alvorlige føtal abnormiteter steg på en dosisafhængig måde. Ved doser på 0,01 mg/kg/d (nyre, skulder- og milt knogler), større end eller lig med 0,01 mg/kg/d (øjne og forelimbs), 0,025 mg/kg/d (hjerne, hale og vertebrae, store blodkar og hjerte), umbilical ledning), større end eller lig med 0,025 mg/kg/kg/d (stam) og hjerte, og umbilical ledning, større end eller lig med 0,025 mg/kg/kg/kg/d (stammene) og og umbilical ledning), større end eller lig med til 0,025 mg/kg/kg/kg/kg/d (d (stater 0,05 mg/kg/d (parietal knogler og store blodkar), forekomsten af ​​misdannelser overskred samtidig og historisk kontrol. Uregelmæssig ossificering og/eller skelet -abnormiteter findes i kraniet og kraven, ryghvirvler og ribben, brystben, bækken, coccyx og skulder- og miltben; Der er også en let dosisafhængig skeletvariation synlig. Viscerale abnormiteter findes i blodkar, lunger, lever og spiserør. Alle behandlingsgrupper viste dobbeltlober eller forgreninger af galdeblæren, men der blev ikke observeret nogen lignende situation i kontrolgruppen.

4. I perioden fra dag 6 i graviditet til fravænning eller afslutning af amning på dag 24 blev hunrotter subkutant injiceret med 0,1, 0,25 og 1,0 mg/kg/d liraglutid. I henhold til plasma -AUC -beregninger var systemisk eksponering ca. 0,8, 3 og 11 gange den for menneskelig eksponering under MRHD. Leveringsperioden for de fleste dyr i behandlingsgruppen blev lidt forsinket. Den gennemsnitlige vægt af nyfødte i behandlingsgruppen var lavere end i kontrolgruppen. Kvindelige rotter i dosisgruppen 1,0 mg/kg/d udviste blodtab og spændingsadfærd under fødslen. Den gennemsnitlige kropsvægt af F2 -afkomrotter i behandlingsgruppen fra fødslen til den 14. dag efter fødslen var lavere end kontrolgruppen, men forskellene mellem grupperne nåede ikke statistisk betydning.

Liraglutidpulverer en kunstigt syntetiseret acyleret human glukagon som peptid-1 (GLP-1) analog med over 97% sekvenslighed sammenlignet med naturlig GLP-1. Den molekylære struktur af liraglutid inkluderer følgende hovedegenskaber: den 34. lysinposition af det naturlige GLP-1-molekyle erstattes af arginin, som ikke kun bevarer og forlænger bindingstiden mellem acyleringsprodukter og proteiner, men også væsentligt overvinder ulempen ved GLP's let nedbrydning; En yderligere fedtsyresidekæde blev tilsat til den 26. lysin, som hjælper med at forlænge halveringstiden for acyleringsprodukter in vivo. Disse unikke molekylære ændringer har gjort Delilaglutid til at vise fremragende effekter i klinisk behandling, især i diabetes og vægttab.

De kemiske metoder til syntese af liraglutid inkluderer hovedsageligt følgende trin:

1. fragmentsyntese

For det første skal du dele hele liraglutidet i flere segmenter, som generelt kan opdeles i fem segmenter: 1. til 4. aminosyrer, 5. til 10. til 10. til 16. til 16. aminosyrer, 17. til 24. aminosyrer og 25. til 31. aminosyrer. Hvert fragment syntetiseres separat, hvilket kan reducere vanskeligheden og omkostningerne ved peptidsyntese og forbedre synteseffektiviteten.

Til syntese af hvert fragment anvendes generelt fastfase-syntese eller flydende fase-syntesemetoder. Metoden med fast fase-syntese involverer tilslutning af carboxylgrupper af aminosyrer til harpiksen, og tilsætter derefter sekventielt aminosyrerne til harpiksen i rækkefølge og til sidst afskærer peptiderne fra harpiksen. Metoden med flydende fase-syntese involverer at opløse alle aminosyrer i et organisk opløsningsmiddel og derefter kondensere dem i rækkefølge for at danne peptidfragmenter.

2. Koblingsreaktion

Udfør koblingsreaktion på de 5 peptidfragmenter syntetiseret i trin 1 for at danne et komplet liraglutid. Koblingsreaktionen kan udføres ved hjælp af kemiske eller biologiske koblingsmidler, og den specifikke metode kan vælges i henhold til faktiske behov.

I koblingsreaktionen er det nødvendigt at forbinde aminogruppen i hvert fragment med carboxylgruppen i det næste fragment. For at opnå dette er det normalt nødvendigt at bruge kondensationsmidler som DIC eller BOP. Disse kondensationsmidler kan fremme reaktionen mellem amino- og carboxylgrupper og danne peptidbindinger. I koblingsreaktionen bør der også rettes opmærksomhed på at kontrollere reaktionsbetingelserne, såsom temperatur, pH -værdi og reaktionstid, for at sikre reaktionens glatte fremskridt.

3. rensning og identifikation

Det syntetiserede liraglutid skal renses og identificeres for at sikre renheden og kvaliteten af ​​produktet. Oprensning udføres normalt ved anvendelse af metoder, såsom højtydende væskekromatografi (HPLC) eller elektroforese, efterfulgt af identifikation ved anvendelse af massespektrometri, nuklear magnetisk resonans og andre metoder. På disse måder kan det sikres, at molekylvægt og sekvens af det syntetiserede produkt er i overensstemmelse med forventningerne, og der er ingen urenheder eller biproduktrester.

4. andre ændringer

Ud over ovenstående trin kræves nogle gange andre ændringer, såsom tilføjelse eller fjernelse af beskyttelsesgrupper. Disse trin er også vigtige, da de kan beskytte de aktive grupper i peptider mod at blive ødelagt eller bivirkninger forekommer, hvilket forbedrer kvaliteten og udbyttet af syntetiseretLiraglutidpulver.

Ovenstående er de vigtigste kemiske metoder til syntese af liraglutid, men selvfølgelig skal nogle detaljer og teknikker bemærkes i praktisk drift. For eksempel kan det at vælge det passende opløsningsmiddelsystem, kontrollere temperatur og pH og bruge passende katalysatorer alle påvirke synteseffektiviteten og produktkvaliteten. Derfor skal der i praktisk drift foretages justeringer og optimeringer i henhold til specifikke omstændigheder.

Liraglutid (en langtidsvirkende GLP-1-receptoragonist) spiller en betydelig rolle i behandlingen af ​​diabetes. For at sikre dens kvalitetskontrolbarhed er det nødvendigt at etablere videnskabelige og strenge analytiske metoder og udføre systematisk validering for at sikre pålideligheden af ​​disse metoder. Følgende analyse udføres fra tre aspekter: valideringselementer, valideringsmetoder og nøglekontrolpunkter.

Kernebekræftelseselementer og tekniske krav

Specificitet

Formål: At bevise, at metoden kan skelne liraglutid fra urenheder, nedbrydningsprodukter og excipienser.

Implementeringsstrategi:

Kromatografi: Brug HPLC-UV eller UPLC-MS. Gennem tvungen nedbrydningstest (såsom høj temperatur, lyseksponering, syre-base-hydrolyse), genererer nedbrydningsprodukter og verificerer separationsgraden af ​​hovedtoppen og urenhedstoppen (større end eller lig med 1,5). I undersøgelsen af ​​APOE-/- musemodellen, efter liraglutid, er for eksempel oxideret, skal nedbrydningsprodukterne (såsom myresyreaddukter) bekræftes ved kromatografisk analyse for at sikre adskillelseseffekten af ​​nedbrydningsprodukter fra hovedtoppen.

Spektroskopi: Brug en PDA -detektor til at sammenligne UV -spektre for hovedtoppen og urenhederne, og bekræft toppens renhed.

Blank kontrol: Kontroller fraværet af falske positive signaler ved hjælp af prøver uden liraglutid (såsom excipientløsninger).

 

Nøjagtighed

Formål: At sikre, at de målte resultater er tæt på den sande værdi, og gendannelsesgraden styres inden for 98% - 102%.

Implementeringsstrategi:

Standardtilsætning Genopretningstest: Tilføj et kendt beløb af referencestof til en prøve med kendt indhold af liraglutid og mål gendannelsesgraden. For eksempel tilsættes i analysen af ​​formuleringen 0,5 mg/ml, 1,0 mg/ml og 1,5 mg/ml liraglutid til den tomme excipientopløsning, gentager hver koncentration 3 gange og beregner den gennemsnitlige gendannelsesgrad.

Sammenligningsmetode: Sammenlign med klassiske metoder (såsom titrering) eller verificerede metoder (såsom farmakopoeia -metoder), og resultatafvigelsen skal være mindre end eller lig med 2%.

 

Præcision

Formål: At evaluere graden af ​​nærhed af gentagne måleresultater med RSD mindre end eller lig med 2%.

Implementeringsstrategi:

Gentagelighed: Foretag 6 på hinanden følgende målinger af den samme prøve af den samme analytiker, det samme instrument og den samme batch af prøver, og beregne RSD.

Mellempræcision: Beregn RSD ved at bestemme den samme batch af prøver fra forskellige analytikere, forskellige instrumenter og forskellige datoer. For eksempel skal gentageligheden RSD være mindre end eller lig med 1,5%ved bestemmelse af liraglutidindhold, og den mellemliggende præcisions RSD skal være mindre end eller lig med 2,0%.

Reproducerbarhed: Samarbejdsbekræftelse af flere laboratorier (såsom farmakopé standardmetoder), RSD skal overholde vejledningsprincipperne.

 

Detektionsgrænse og kvantificeringsgrænse

Formål: At bestemme den minimale koncentration, som metoden kan detektere og kvantificere liraglutid.

Implementeringsstrategi:

Signal-til-støjforholdsmetode: Bestem LOD med et 3: 1-signal-til-støj-forhold, og bestemm LOQ med et 10: 1-signal-til-støj-forhold. For eksempel i HPLC-UV-metoden kan LIRAGLUTID-LODLUTIDen være så lav som 0,01 ug/ml, og LOQ er 0,05 ug/ml.

Standardkurvemetode: Beregn LOD og LOQ ved hjælp af responssignalerne af lavkoncentrationsstandardstoffer (såsom 0,1 ug/ml - 1 ug/ml).

 

Linearitet

Formål: At bevise, at responssignalet er proportionalt med koncentrationen, med R² større end eller lig med 0,999.

Implementeringsstrategi:

Gradientkoncentrationstest: Forbered 5-7-koncentrationsgradienter (såsom 0,1 mg/ml - 2.0 mg/ml) standardopløsninger, måler spidsområdet eller responsværdien og tegner standardkurven.

Restanalyse: Kontroller, om resterne er tilfældigt fordelt, og der er ingen systematisk afvigelse.

 

Rækkevidde

Formål: At bestemme det relevante koncentrationsområde for metoden, normalt 120% af LOQ til den øvre grænse for linearitet.

Implementeringsstrategi:

Indholdsbestemmelse: Området er indstillet til 80% - 120% af det mærkede beløb. For eksempel skal indholdsbestemmelsesområdet for liraglutidformulering være 0,4 mg/ml - 1.2 mg/ml. Urenhedskontrol: I henhold til ICH Q3D -retningslinjen skal du indstille grænseområdet for urenheder (f.eks. Enkelt urenhed mindre end eller lig med 0,5%, total urenhed mindre end eller lig med 2,0%).

Valideringsdokumenter og datastyring

01

Valideringsplan og rapport

Definer klart valideringsemner, metoder, acceptstandarder og unormale håndteringsprocedurer. For eksempel, hvis præcisionen RSD overstiger grænsen, er det nødvendigt at undersøge instrumentfejl eller operationelle fejl.

Registrer de originale data (såsom kromatogrammer, standardkurver, beregning af genvindingsfrekvens) for at sikre sporbarhed.

02

Udvikling af stabilitetsindikationsmetode

Ved obligatoriske nedbrydningstest skal den dække oxidation, lyseksponering, hydrolyse osv. For at simulere faktiske opbevaringsbetingelser. For eksempel skal liraglutid placeret ved 60 grader i 48 timer, nedbrydningshastigheden skal være større end eller lig med 10% for at verificere metodens evne til at detektere nedbrydningsprodukter.

03

Lovgivningsmæssig overholdelse

Følg ICH Q2 (R2), USP<1225>, og kinesiske GMP -retningslinjer for at sikre, at valideringspunkterne dækker kerneindikatorer såsom specificitet og nøjagtighed.

Til elementær urenhedsanalyse skal det overholde ICH Q3D og USP<233>Krav, der kontrollerer grænserne for 1-klasse elementer såsom AS, CD og PB.

Populære tags: liraglutide pulver CAS 204656-20-2, leverandører, producenter, fabrik, engros, køb, pris, bulk, til salg