Fluorescein isothiocyanat cas 27072-45-3

Fluorescein isothiocyanatorange rød, isothiocyanat fluorescerende gul, isothiocyanat fluorescerende rød, isothiocyanat fluorescein isomer I, 5- isothiocyanat fluorescein. Gult pulver. Det er hygroskopisk. Det kan binde med forskellige antistofproteiner, og antistoffet efter binding mister ikke specificiteten af binding med visse antigen. Det har stadig stærk grøn fluorescens i alkalisk opløsning. Efter tilsætning af syre udfælder det, og fluorescensen forsvinder. Det er lidt opløseligt i acetone, ether og olieether. Det er et biokemisk reagens såvel som et medicinsk diagnostisk lægemiddel, som hurtigt kan diagnosticere sygdomme forårsaget af bakterier, vira, parasitter osv. Derudover kan det binde med forskellige antistofproteiner, og antistoffet efter binding mister ikke specificiteten af binding med visse antigen, og der er stadig stærk grøn fluorescens i alkalisk opløsning. Efter tilsætning af syre udfælder det, og fluorescensen forsvinder, og den er lidt opløselig i acetone, ether og petroleumsether.

Undersøgelse af egenskaberne vedfluorescein isothiocyanatMærket insulin til amineret gelatine og dets anvendelse i nasal slimhindeadministration:

Under betingelse af ingen ekstern emulgator blev den vandige opløsning af amineret gelatine spredt i olivenolie, og en ny type positivt ladede gelmikrosfærer, aminerede gelatinmikrosfærer, blev fremstillet gennem processerne med emulgering, gelering, dehydrering og tværbinding. Den gennemsnitlige partikelstørrelse af mikrosfærer er 40-50 μ m. Størrelsen er jævnt fordelt. De tørrede mikrosfærer kan absorbere ca. 20 gange af deres egen vægt af vand til dannelse af hydrogeler. Aminoede gelatinmikrosfærer har højere aminoindhold end gelatinmikrosfærer. De er positivt opladet i destilleret vand- og fosfatbufferopløsning, og ZATA -potentialet i destilleret vand er 41,5 mV.

Med stigningen i glutaraldehydkoncentration eller forlængelse af tværbindingsreaktionstid faldt aminoindholdet i mikrosfærer. Uanset de tværbindende reaktionsbetingelser har de aminerede gelatinmikrosfærer, der er fremstillet ved denne metode, imidlertid højere primært aminoindhold end gelatinmikrosfærer. Aminoede gelatinmikrosfærer kan nedbrydes hurtigt (<1h) in the presence of trypsin, but slowly (>20H) i pepsin og syre-base-medium. Interaktionen mellem aminerede gelatinmikrosfærer og mucin er stærkere end den mellem gelatinmikrosfærer. Den høje positive ladningstæthed af aminerede gelatinmikrosfærer er hovedårsagen til dens stærke interaktion med mucin. De bioadhæsende egenskaber ved aminerede gelatinmikrosfærer blev undersøgt ved fluorescensmærkningsmetode og in vitro -enzymnedbrydningsteknologi ved anvendelse af den isolerede gastriske perfusionsvaskemodel og in vivo -eksperiment i rotter.

Resultaterne viste, at antallet af aminerede gelatinmikrosfærer, der blev bevaret i den isolerede rotte -mave under de samme eksperimentelle betingelser Den afgørende faktor for gastrisk fastholdelse af mikrosfærer i denne model. However, in the experiment, it was found that the amount of aminated gelatin microspheres retained in the isolated rat stomach decreased with the increase of the concentration of the crosslinking agent glutaraldehyde when preparing the microspheres, which indicated that the gastric mucosal adhesion of the aminated gelatin microspheres might be affected by the amino content on the surface of the microspheres or the degree of tværbinding.

De eksperimentelle resultater in vivo hos rotter viste, at amino -gelatinmikrosfærer havde bedre slimhindeadhæsion end gelatinmikrosfærer. Virkningerne af amineret gelatine på næseabsorptionen af glucan og insulin blev undersøgt hos raske rotter. Resultaterne viste, at 0. 2% (WN) aminogelatin kunne markant fremme absorptionen af fluorescein -isothiocyanat -glucan fra rotte -nasal slimhinde med en biotilgængelighed på 23,8%. Efter intranasal indgivelse af 10 IE insulinphosphatbuffer indeholdende 0 2% (w/v) amino gelatin, var blodsukkerniveauet signifikant lavere end for insulinphosphatbufferen.

Fluorescein isothiocyanat(FITC), som en klassisk fluorescerende mærkningsreagens, er blevet et uundværligt værktøj inden for biologi, medicin og materialevidenskab på grund af dets høje kvanteudbytte, fremragende fotostabilitet og god biokompatibilitet.

Biomolekylære markører: Præcis sporing fra proteiner til nukleinsyrer

 

Isothiocyanatgruppen (- n=c=s) af FITC kan gennemgå kovalente reaktioner med aktive grupper såsom aminogrupper i biomolekyler, der danner stabile fluorescerende mærkningskomplekser. Denne egenskab gør det til det foretrukne reagens for protein, nukleinsyre og peptidmærkning.
Proteinmærkning og funktionel forskning
FITC opnår specifik mærkning ved binding til lysinrester af proteiner, såsom antistoffer og lektiner. I immunofluorescenseksperimenter kan FITC -mærkede antistoffer for eksempel binde til celleoverfladeantigener og kvantitativt analysere antigenekspressionsniveauer gennem fluorescensmikroskopi eller flowcytometri. De eksperimentelle data viser, at fluorescensintensiteten af FITC IgG -konjugat er lineært relateret til antigenkoncentrationen, og detektionsfølsomheden kan nå Danak -niveauet. Derudover kan FITC -mærkede proteiner også bruges til proteininteraktionsundersøgelser, såsom analyse af proteinkonformationelle ændringer gennem fluorescensresonansenergioverførsel (FRET) teknologi.

 

Nukleinsyremærkning og molekylær hybridisering
FITC kan kemisk modificeres for at mærke 5 'eller 3' slutningen af nukleinsyrer til fluorescens in situ hybridiseringsteknologi (FISH). I kræftforskning kan FITC -mærkede sonder specifikt binde til kromosomale unormale regioner for at hjælpe med diagnosen hæmatologiske sygdomme, såsom leukæmi og lymfom. F.eks. Kan FITC-prober, der er målrettet mod BCR-ABL-fusionsgener, vise gule fluorescerende signaler i interfasecellekerner med en nøjagtighedshastighed på over 95%.
Peptidmærkning og lægemiddelafgivelse
FITC -mærkede peptider spiller en vigtig rolle i lægemiddelafgivelsessystemer. Ved at tage M2PEP-FITC som et eksempel er dette molekyle sammensat af et målrettet peptid M2PEP og en FITC-fluorescerende gruppe, som specifikt kan genkende tumorcelleoverfladeceptorer og opnå målrettet lægemiddelafgivelse. Eksperimenter har vist, at akkumuleringen af M2PEP-FITC-mærket liposomer i tumorvæv er 3,2 gange den for frie medikamenter, hvilket forbedrer terapeutisk effektivitet og reducerer bivirkninger markant.

Medicinsk diagnose: Fra patogendetektion til tidlig screening af tumorer

 

Fluorescensegenskaberne for FITC gør det til "guldstandard" inden for in vitro -diagnostik, der er vidt anvendt i teknikker såsom immunokromatografi, flowcytometri og ELISA.
Hurtig påvisning af patogener
FITC -mærkede antistoffer kan anvendes til hurtig diagnose af bakterielle, virale og parasitiske infektioner. For eksempel binder FITC -mærket anti -malaria -antistoffer i malaria -diagnose til patientens blodudstrygning, og det grønne fluorescenssignal for parasitten observeres gennem fluorescensmikroskopi. Detektionstiden forkortes fra 2 timer i traditionelle metoder til 15 minutter, og følsomheden når 98%. Derudover kan FITC-mærkede nukleinsyreprober også bruges til at detektere respiratorisk virus nukleinsyrer, såsom ORF1AB-genet af SARS-CoV -2, med en specificitet på 99,2%.

 

Tumormarkører
I flowcytometri,Fuorescein isothiocyanatMærkede anti-CD45-antistoffer kan skelne leukæmiceller fra normale blodlegemer. Dataene viser, at den positive hastighed af FITC -mærket CD34 -antistof i diagnosen akut myeloide leukæmi (AML) er 85%, hvilket er 20% højere end traditionel morfologisk undersøgelse. Med hensyn til tidlig screening af tumorer kan FITC mærket cirkulerende tumorceller (CTC) detektionsteknologi fange tumorceller i ekstremt lave koncentrationer i perifert blod, hvilket tilvejebringer en ny metode til tidlig diagnose af faste tumorer, såsom brystkræft og lungekræft.
Diagnose af autoimmune sygdomme
I ELISA -teknologi kan FITC -mærkede autoantistoffer (såsom anti -nukleare antistoffer og anti -dobbeltstrengede DNA -antistoffer) anvendes til diagnose af sygdomme, såsom systemisk lupus erythematosus (SLE). Eksperimenter har vist, at FITC-ELISA har en følsomhed på 92% og en specificitet på 95% til påvisning af anti SM-antistoffer, hvilket er signifikant bedre end traditionelle immunofluorescensmetoder.

Cell Biology Research: Fra subcellulær struktur til dynamisk sporing

 

Cellepermeabiliteten og den lave toksicitet af FITC gør det til et ideelt værktøj til celleafbildning, der er vidt anvendt i organelle lokalisering, observation af celledeling og apoptoseforskning.
Celleorganelmærkning og dynamisk observation
FITC-mærkede mitokondriske sonder (såsom MitoTracker Green) kan specifikt binde til mitokondrisk membranpotentiale og overvåge mitokondriske morfologiske ændringer i realtid. I neuronal forskning kan FITC -mærkede mikrotubulusproteinantistoffer vise den dynamiske udvidelse af aksonvækstkegler, hvilket afslører mekanismen for neurale udvikling. Derudover kan FITC -mærkede lysosomprober (Lysotracker Green) også bruges til at undersøge autofagiprocesser, hvilket kvantificerer antallet af autofagosomer gennem ændringer i fluorescensintensitet.

 

Cellecyklus og apoptoseanalyse
I flowcytometri kan FITC mærket propidiumiodid (PI) binde til DNA og skelne forskellige stadier af cellecyklussen (G 0/G1, S, G2/M) ved fluorescensintensitet. Eksperimentelle data viser, at følsomheden af FITC-PI dobbeltfarvningsmetode til påvisning af celle-apoptose er 98%, hvilket er 30% højere end den traditionelle Trypan-blå farvningsmetode. Derudover kan FITC -mærkede annexin V -prober specifikt binde til phosphatidylserin eksponeret på overfladen af apoptotiske celler og opnå præcis identifikation af tidlige apoptotiske celler.
Forskning i cellemigration og invasion
I Transwell-eksperimenter kan FITC-mærkede celler overvåge migrationsprocessen i realtid. I undersøgelsen af tumormetastase er migrationshastigheden for FITC-mærket brystkræftceller (MCF -7) gennem matrixlimet positivt korreleret med invasionsevnen, hvilket tilvejebringer kvantitative indikatorer til screening af antitumorlægemidler.

Lægemiddeludvikling: Fra målvalidering til effektivitetsevaluering

 

FITC spiller flere roller i lægemiddeludvikling, herunder målvalidering, evaluering af lægemiddelafgivelsessystemet og farmakokinetiske undersøgelser.
Målvalidering og mekanisme for handlingsforskning
FITC -mærket små molekyleinhibitorer kan bruges til at validere lægemiddelmål. F.eks. Kan FITC -mærkede EGFR -hæmmere (såsom gefitinib) demonstrere binding af medikamenter til EGFR -receptorer på overfladen af tumorceller, hvilket kvantificerer bindingsaffiniteten (KD -værdi) gennem fluorescensintensitet. Derudover kan FITC -mærket siRNA også bruges til at undersøge gens lyddæmpningseffektivitet, hvilket giver et grundlag for RNA -interferensbehandling.

Evaluering af lægemiddelforsyningssystem
FITC-mærkede nanopartikler (såsom liposomer og polymermikrosfærer) kan overvåge fordelingen og frigive adfærd af medikamenter in vivo i realtid.

 

Eksperimenter har vist, at akkumulering af FITC -mærkede pegylerede liposomer i tumorvæv er 2,8 gange den for frie medikamenter, og fluorescenssignalet kan vare i 24 timer, hvilket giver visuelle data til optimering af lægemiddelafgivelsessystemer.

Farmakokinetiske og toksikologiske undersøgelser
FITC -mærkede lægemiddelmolekyler kan analyseres kvantitativt for deres absorption, distribution, stofskifte og udskillelse (ADME) processer in vivo gennem fluorescensafbildningsteknologi. F.eks. Er fluorescensintensiteten af FITC -mærket antibiotika (såsom vancomycin) i nyrerne lineært relateret til lægemiddelkoncentration, hvilket giver et grundlag for optimering af lægemiddeldosering. Derudover kan FITC -mærkede cytotoksicitetsassays også evaluere skaden på medikamenter til normale celler og guide sikkerhedsevalueringer.

Materialsvidenskab: Fra sensorer til fluorescerende sonder

 

Fluorescensresponskarakteristika for FITC gør det unikt anvendeligt inden for materialevidenskab, herunder udvikling af pH -sensorer, temperatursensorer og metalionprober.
PH -responsiv fluorescenssensor
Fluorescensintensiteten affluorescein isothiocyanat is significantly affected by the pH value of the solution. In weakly acidic environments (pH 5.0-6.5), protonation of FITC groups leads to increased fluorescence intensity; Under alkaline conditions (pH>8. 0), fluorescens slukkes. Baseret på denne egenskab kan FITC-modificerede nanopartikler bruges til at overvåge intracellulære syre-base-svingninger. F.eks. Er fluorescensintensiteten af FITC Biliribin -kompleks i tumormikromiljø 2,3 gange det for normalt væv, hvilket giver en ny metode til tumordiagnose.

 

Temperaturresponsiv fluorescerende sonde
Fluorescenslivet af FITC ændres med temperaturen. Under betingelser med lav temperatur (4 grader) udvides fluorescenslevetiden for FITC -mærkede polymermikrosfærer til 5,2 nanosekunder, hvilket er 1,8 gange højere end stuetemperatur (25 grader). Denne egenskab gør det til et ideelt værktøj til at studere faseovergangsprocesser og celle kryokonservering.
Metaliondetektionsprobe
FITC reducerer signifikant fluorescensintensitet, når det kombineres med metalioner såsom Cu ² ⁺ og Hg ² ⁺, hvilket gør det velegnet til miljøovervågning. F.eks. Har FITC -modificerede silicagel -nanopartikler en detektionsgrænse på 0. 1 nm for Hg ² ⁺ i vand, hvilket er 100 gange højere end traditionel atomabsorptionsspektroskopi.

Landbrug og husdyr: Fra patogendetektion til forskellige forbedringer

 

Anvendelsen af FITC i landbrugsområdet ekspanderer gradvist, herunder plantevirusdetektion, diagnose af dyresygdomme og identifikation af sort.
Hurtig påvisning af plantevirus
FITC -mærkede virusantistoffer kan bruges til at detektere tobaksmosaikvirus (TMV), agurkmosaikvirus (CMV) og andre vira. Eksperimenter har vist, at følsomheden af FITC-ELISA til påvisning af TMV er 0. 1 ng/ml, som er 10 gange højere end traditionelle serologiske metoder. Derudover kan FITC -mærkede nukleinsyreprober også bruges til at detektere eksogene gener i genetisk modificerede afgrøder, såsom insektresistente BT -gener.

Diagnose af dyresygdomme
FITC -mærkede antistoffer kan bruges til at påvise svinefebervirus (CSFV), aviær influenzavirus (AIV) og andre vira.

 

Ved diagnosen svinefeber binder FITC -mærket anti CSFV -antistoffer til vævsektioner og observerer virusfordeling gennem fluorescensmikroskopi, hvilket reducerer detektionstiden fra traditionelle metoder på 3 dage til 6 timer. Derudover kan FITC -mærket flowcytometri også bruges til at detektere patogenespecifikke T -celler i dyreblod og evaluere immunresponsintensitet.
Identifikation af sort renhed
FITC -mærkede DNA -prober kan bruges til at identificere renheden af afgrødesorter. F.eks. Kan FITC -sonden, der er målrettet mod risblast sygdomsmodstandsgenet Pi TA, nøjagtigt skelne mellem homozygoter og heterozygoter i hybrid risfrø, med en renhedsidentifikationsnøjagtighed på 99,5%. Derudover kan FITC -mærket SSR -molekylære markører også bruges til genetisk mangfoldighedsanalyse af husdyr- og fjerkræacer, hvilket tilvejebringer videnskabeligt grundlag for avl.

Syntese af FITC: 4- nitrophthalisk anhydrid (se C8H3NO5, [5466-84-2]) reagerer med resorcinol ved 195-200 grad C for 10H, cykliser i en blanding af 3 'nitrofluorescein og 4' - nitrofluorescein, acetyes med acetiske Anhydrid, hydrolyser med mættet natriumhydroxidethanolopløsning, 4 "nitrofluorescein opnås. Derefter er 4 ' - nitrofluorescein opløst i ammoniakvand, reageres med nikkel rexhlet og hydrazinhydrat ved stuetemperatur for 2H og reduceres til 4' - AMINO fluorescel. elimineret for at fåfluorescein isothiocyanat.

FITC -rent produkt er gult eller orange krystallinsk pulver, som let er opløseligt i vand og alkoholopløsningsmiddel. Der er to isomerer, blandt hvilke isomer type I er bedre i effektivitet, stabilitet og proteinbinding. Molekylvægten af FITC er 389,4, den maksimale absorptionsbølgelængde er 490 ~ 495 nm, og den maksimale emissionsbølgelængde er 520 ~ 530 nm, der viser lys gul grøn fluorescens. FITC kan opbevares i mange år på kolde, mørke og tørre steder og er det mest anvendte fluorescein. Dens største fordel er, at det menneskelige øje er mere følsomt over for gulgrøn, og den grønne fluorescens i sektionens prøve er normalt mindre end rødt.

Populære tags: fluorescein isothiocyanat cas 27072-45-3, leverandører, producenter, fabrik, engros, køb, pris, bulk, til salg